Константин Северинов. Молекулярная биология: Как клонируют ДНК . Инвестируем в производство инсулина

Специалист в области молекулярной биологии, профессор Сколковского института науки и технологий, профессор Ратгерского университета (США) Константин Северинов проводит на моем канале курс лекций по молекулярной биологии. Это продолжение лекции: Как клонируют ДНК - кошмар борцов с ГМО. На этот раз на основе полученных знаний пытаемся открыть производство инсулина и убедить в его состоятельности потенциального инвестора. Домашка -    • Запись   00:00 Начало 00:26 Вступление. Оргвопросы 02:40 Как будет устроен Университет Северинова 05:18 План лекции 06:55 Явление рестрикции-модификации 09:04 Механизм рестрикции-модификации: способ защиты от чужеродной ДНК 12:48 Ферменты рестрикции-рестриктазы (эндонуклеазы рестрикции) 16:07 Плазмида кишечной палочки E. coli pBR322 18:51 Рестрикционный перевар плазмиды 20:11 Плазмида pBR322 подробнее 21:10 Рестрикционное картирование плазмиды 25:17 Как установить важность участка ДНК для функции плазмиды 33:08 Направленные делеции 42:08 Ферменты для молекулярного клонирования. Как их искать? 50:54 Можно ли плазмид уменьшить размер, удалив некодирующие участки? Это даст преимущество оставшимся в бактерии генам этой плазмиды? 52:24 Можно создать рестриктазы искусственной селекцией тех бактерий, которые будут выживать при взаимодействии с целевым вирусом? 53:01 Плазмиды могут реплицироваться в бактерии бесконечно или ограниченное количество раз? 53:43 Насколько рестриктазы похожи друг на друга? 54:41 Клонирование ДНК 58:12 Молекулярное клонирование 58:38 Секвенирование ДНК (Фред Сенгер) 1:01:34 Универсальные прайсы для секвенирования/векторы для клонирования/библиотеки клонов 1:04:05 Диабет и проблема свиного инсулина 1:04:51 Как "выделить" ген интереса из генома? 1:05:09 Генная инициатива в СССР 1:08:30 Создание геномной библиотеки 1:09:48 Рестрикционный перевар/электрофорез ДНК человека 1:11:26 Плавление и "отжиг" (гибридизации) ДНК 1:14:43 Центральная догма молекулярной биологии 1:15:14 Вырождение пробы для гибридизации ДНК 1:18:07 Гибридизации по Саузерну 1:21:03 Создание геномной библиотеки 1:22:34 Идентификация гена интереса с помощью гибридизации ДНК в колониях бактерий 1:25:45 Как математически определить минимально достаточную область? 1:30:05 Можно таким образом найти ген, кодирующий молекулы инсулина с более высоким сродством к рецепторам? 1:31:43 Экспрессивное клонирование 1:33:23 Основная разница в трансляции РНК у прокариот и эукариот 1:35:47 Основная разница в транскрипции РНК у прокариот и эукариот 1:38:58 Проверка сверхпродукции белка интереса 1:45:35 Молекулярное клонирование: рекомбинантные белки 1:51:17 Советские рекомбинантные белки 1:53:13 "Светящиеся" бактерии. 1:54:38 С чем связано, что у кого-то шапероны предотвращают формирование прионных структур, типа амилоидных или синуклеиновых структур, а у других нет? 1:55:53 Почему нельзя использовать бактерии-симбионты, живущие в кишечнике, для вырабатывания инсулина? 1:57:10 Почему до сих пор используют инсулин? 1:58:14 Советский инсулин "не взлетел" потому, что не было стадии очистки и технологии масштабирования? 2:01:11 Почему отечественные учёные не сделают обращение в компетентные органы с тем, чтобы разрешить вопрос налаживания качественного конкурентного производства? 2:02:05 Не проще вколоть человеку мРНК, чтобы он сам производил инсулин? 2:03:18 Рестриктаза могла порезать и ген интереса, но не тронуть участок, комплиментарный нашей пробе, и мы обнаружим это только на этапе электрофореза белка? 2:04:41 Заключение. Оргвопросы 2:09:20 Благодарности Предыдущие лекции -    • Константин Северинов. "Введение в молекуля...   стать патроном -   / plushev   Поддержать канал биткоином - bc1qp8kagzf9q26jj69ncd0kmgxm9lu56y92lxygn5 Оформление -
Каналы соратников: Майкл Наки - наш совместный стрим и грандиозные ролики -    / @macknack   "Кек и Символ" Тани Фельгенгауэр -    / @tfelg   #Северинов #Плющев #молекулярнаябиология